RFLP

RFLP

Polymorphisme de longueur des fragments de restriction

Traduit d'après l'article anglais RFLP

En biologie moléculaire, le polymorphisme de longueur des fragments de restriction (ou RFLP, de l'anglais restriction fragment length polymorphism) est utilisé dans deux sens :

  • comme une caractéristique des molécules d'ADN permettant de les distinguer les unes des autres,
  • comme la technique de laboratoire qui utilise cette caractéristique pour différencier ou comparer des molécules d'ADN. Cette technique est utilisée pour la réalisation d'empreintes génétiques et dans les tests de paternité.

Méthode

Étapes de la technique RFLP:

  1. extraction de l'ADN,
  2. Amplification de l'ADN, PCR
  3. hydrolyse de l'ADN par une enzyme de restriction,
  4. séparation des fragments de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose,
  5. dénaturation de l'ADN par la soude pour obtenir de l'ADN monocaténaire,
  6. transfert sur membrane, renforcement de la fixation.

L'ADN d'un individu ou d'une cellule est d'abord extrait et purifié. L'ADN purifié peut être amplifié par PCR. L'ADN est ensuite coupé en fragments de restriction par une enzyme de restriction, cette dernière coupant l'ADN au niveau d'une séquence qui lui est spécifique (site de restriction). Les fragments d'ADN ainsi obtenus, nommés fragments de restriction, sont ensuite séparés selon leur longueur par électrophorèse sur gel d'agarose. Le gel obtenu est ensuite analysé par Southern Blotting et révélé avec une ou plusieurs sondes.

Résultat

La distance entre deux sites de coupure de l'enzyme de restriction (site de restriction) varie selon les individus (du fait du polymorphisme des individus) : de ce fait la longueur des fragments de restriction varie. Les positions de certaines bandes d'ADN (sur le gel d'électrophorèse) seront donc différentes d'un individu à l'autre. Le polymorphisme existant entre individus d'une même espèce peut être ainsi visualisé grace au polymorphisme de leur ADN. Cette technique permet de mettre en évidence les "particularités" d'un individu. Elle permet également de montrer les relations génétiques qui peuvent exister entre individus, du fait de la transmission des caractères génétiques de parents à enfant. La technique est également utilisée pour étudier les relations entre différentes espèces.

Articles connexes


  • Portail de la biologie cellulaire et moléculaire Portail de la biologie cellulaire et moléculaire

Wikimedia Foundation. 2010.

Contenu soumis à la licence CC-BY-SA. Source : Article RFLP de Wikipédia en français (auteurs)

Игры ⚽ Нужен реферат?

Regardez d'autres dictionnaires:

  • RFLP — RFLP. См. ПДРФ. (Источник: «Англо русский толковый словарь генетических терминов». Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., Москва: Изд во ВНИРО, 1995 г.) …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • RFLP — (в английском языке произносится [rif lip]). = restriction fragment length polymorphism (см.). (Источник: «Англо русский толковый словарь генетических терминов». Арефьев В.А., Лисовенко Л.А., Москва: Изд во ВНИРО, 1995 г.) …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • RFLP — abbr. =>> Restriction Fragment Length Polymorphism. Webster s New World Law Dictionary. Susan Ellis Wild. 2000 …   Law dictionary

  • RFLP — Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus, abgekürzt RFLP (sprich: Riflip , von engl.: Restriction Fragment Length Polymorphism, auch PLP: PCR Längen Polymorphismus) bezeichnet Unterschiede von DNA Sequenzen homologer Chromosomen, welche als… …   Deutsch Wikipedia

  • RFLP — /rif lip /, n. restriction fragment length polymorphism: a fragment of DNA, cut by a restriction enzyme, that is different in length for each genetically related group and is used to trace family relationships. Also called riflip. [1985 90] * * * …   Useful english dictionary

  • RFLP — Abbreviation for restriction fragment length polymorphism. * * * restriction fragment length polymorphism * * * RFLP .är (.)ef (.)el pē n RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM * * * restriction fragment length polymorphism …   Medical dictionary

  • RFLP — abbreviation restriction fragment length polymorphism …   New Collegiate Dictionary

  • RFLP — …   Википедия

  • RFLP — See restriction fragment length polymorphism …   Dictionary of molecular biology

  • RFLP — /rif lip /, n. restriction fragment length polymorphism: a fragment of DNA, cut by a restriction enzyme, that is different in length for each genetically related group and is used to trace family relationships. Also called riflip. [1985 90] * * * …   Universalium

Share the article and excerpts

Direct link
Do a right-click on the link above
and select “Copy Link”