Milieu De Culture


Milieu De Culture

Milieu de culture

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Un milieu de culture est un support qui permet la culture de cellules, de bactéries, de levures, de moisissures afin de permettre leur étude. En principe, les cellules trouvent dans ce milieu les composants indispensables pour leur multiplication en grand nombre, rapidement, mais aussi parfois des éléments qui permettront de privilégier un genre bactérien ou une famille. Ainsi, selon le but de la culture, il est possible de placer les micro-organismes dans des conditions optimales, ou tout à fait défavorables.

Il se compose d'une base (agar-agar, eau, minéraux...) ainsi que d'un indicateur coloré de pH ou de réaction d'oxydo-réduction pour permettre de formuler des hypothèses sur le genre.

Il existe aussi des bouillons de culture qui possèdent la même fonction, mais ces milieux ne contiennent pas d'agar-agar, ils sont donc totalement liquides.

Cet article détaillera les caractéristiques des milieux de culture se rapportant à la microbiologie.

Sommaire

Notion de milieu minimum

Un milieu minimum ou milieu défini est un milieu comportant les éléments chimiques strictement nécessaires à la croissance bactérienne, sous une forme utilisable par des bactéries n'ayant pas d'exigence particulière.

  • Composition d'un milieu minimum:
    • Une source de carbone et d'énergie, généralement le glucose.
    • Une source de potassium et de phosphore: K2HPO4
    • Une source d'azote et de soufre: (NH4)2SO4
    • Une source de magnésium: MgCl2
    • Une source de calcium: CaCl2
    • Une source de fer: on emploie le citrate de fer (le citrate a pour rôle de maintenir le fer en solution)
    • Une source d'oligo-élements: sels de Cu, Zn, Co, Ni, B, Ti
    • Une source d'eau, indispensable à toute forme de vie: on utilise l'eau distillée (stérile)
    • Un tampon pH: il permet de maintenir un pH correct voire optimum: KH2PO4 par exemple
  • En l'absence de l'un de ces composants, les bactéries ne se développent pas, car elles ne peuvent synthétiser ces produits.
  • C'est l'adjonction de facteur(s) de croissance approprié(s) qui permet à des bactéries exigeantes de se développer.

Milieu de culture empirique

Un milieu de culture dit empirique est un milieu dont on ne connaît pas exactement la composition.

Ainsi, dans le milieu type cœur-cervelle, il y a de l'eau, de l'agar-agar, de l'hydrolysat de cœur et de cervelle sans que l'on en connaisse les aspects qualitatifs et quantitatifs. Il sera donc utilisé uniquement pour la croissance des bactéries. Il n'a pas d'effet sélectif.

Milieu de culture sélectif

Les milieux de culture dit sélectifs permettent uniquement la culture de certains genres de micro-organismes. Pour cela on ajoute des éléments qui inhibent la croissance des micro-organismes indésirables comme le chlorure de sodium à forte concentration, le thiosulfate de sodium, le cristal violet ou certain antibiotiques etc.

Les éléments ajoutés sont sélectionnés selon les caractéristiques du micro-organisme recherché. Ces milieux sont utilisés pour l'analyse d'un prélèvement polybactérien. Ce milieu ne permet de sélectionner uniquement en cas de crible positif : Résistance à un antibiotique, la prototrophie etc.

Exemples de milieux sélectifs :

  • milieu S-S : il ne permet la croissance que des Salmonelles (Shigella s'y développe moins vite : environ 48 à 72 heures avant d'obtenir une culture exploitable).
  • milieu de Sabouraud : il permet la pousse des mycètes.
  • gélose Kanamycine - Vancomycine, dite "Kana-Vanco" ou KV : elle empêche la pousse des bactéries à Gram positif (action de la vancomycine) et de la plupart des entérobactéries (action de la Kanamycine). Sur ce milieu, poussent préférentiellement des bactéries anaérobies strictes.

Milieu de culture enrichi

Ils contiennent, outre les composants de base, des composants indispensables aux bactéries, que celles-ci ne peuvent pas synthétiser. Ce sont des milieux utilisés pour l'obtention des bactéries dites exigeantes.

Par exemple : les milieux au sang frais (le sang est riche en nutriments divers): Gélose au sang frais ou cuit. Les milieux avec du sérum, du jaune d'œuf : Gélose Baird Parker ou dite BP.

Milieu différentiel

Le milieu de culture dit différentiel ou indicateur' permet de distinguer deux types de microorganismes se développant dans un même milieu[1]. Ce type de milieu utilise certaines caractéristiques biochimiques des microorganismes en présence de certains nutriments ou marqueurs (tel que le rouge neutre, rouge de phénol, l'éosine ou le bleu de méthylène). Ce type de milieu est utilisé pour la détection de microorganismes recombinant dans des lignées bactériennes.

On retrouve parmi les milieux différentiels :


  • la Gélose Éosine Bleu de Méthylène (EMB), qui différentie la fermentation du lactose de celle du saccharose
  • la gélose MacConkey (MCK), qui différentie la fermentation du lactose
  • la Gélose Chapman (MSA), qui différentie la fermentation du mannitol

Voir aussi

Notes et références

  1. (en) Washington JA, Baron's Medical Microbiology (Baron S et al., eds.), Univ of Texas Medical Branch, 1996 (ISBN 0-9631172-1-1), « Principles of Diagnosis » 
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