ATPmetrie

ATPmétrie

L'ATPmétrie est une technique de biologie moléculaire, basée sur le principe de la bioluminescence, qui permet de mesurer la quantité d'ATP présente dans un échantillon.

Sommaire

Principe

Schéma général des réactions de bioluminescences

Chez la luciole, la réaction de bioluminescence à lieu grâce à une activation préalable de la luciférine par l'hydrolyse d'adénosine triphosphate (ATP). Si les concentrations en luciférine-luciférase et en oxygène sont maintenues constantes, alors l'intensité lumineuse est proportionnelle à la quantité d'ATP. En utilisant la luciférine et la luciférase de la luciole, il est donc possible, grâce à un luminomètre, d'obtenir une évaluation de la quantité d'ATP dans un échantillon. La valeur obtenue en unité relative de lumière (ou RLU), permettra grâce à un étalon d'estimer la quantité d'ATP.

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Intérêt

L'ATP est la première source d'énergie de toute cellule vivante et l'on considère que chaque bactérie en contient environ 1 femtogramme. Il est alors possible grâce à cette méthode d'avoir une estimation instantanée de la biomasse totale contenue dans un échantillon en mesurant l'ATP intracellulaire: il faut alors filtrer l'échantillon et lyser les bactéries pour libérer leur ATP

Dans l'eau

Cette méthode ne permet pas de quantifier ni d’identifier les bactéries, mais elle permet d’estimer le risque potentiel de développement dans l'eau d'amibes, donc de biofilms, et de bactéries pathogènes comme les Légionelles. En effet, la colonisation des surfaces (paroi des conduites d'eau, des systèmes de climatisation) par de la biomasse ou des biofilms est un facteur important du risque de développement des Légionelles et d'autres bactéries comme Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus. La surveillance de la biomasse active permet donc d’estimer le risque et de le contrôler. Les coûts de charges d’une installation et son impact sur l’environnement sont ainsi réduits par l’optimisation de l’utilisation des biocides. La rapidité de cette méthode permet un contrôle quotidien afin de réagir rapidement à toute variation de la biomasse dans une installation, contrairement aux méthodes classiques comme la culture cellulaire ou la PCR quantitative.

Dans le sang et les fluides biologiques

Si l'ATPmétrie est opérationnelle pour mesurer l'ATP dans l'eau, elle est actuellement testée pour une application au sang, en particulier, et à d'autres fluides comme l'urine, afin de détecter précocement les risques d'infections d'origine bactérienne. La méthode se heurte à l'heure actuelle aux nombreux inhibiteurs présents dans les liquides biologiques.

Liens externes

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