Barrière hémato-encéphalique

Pour les articles homonymes, voir BHE.

Les astrocytes de type 1 entourant les capillaires sanguins au niveau du cerveau.

La barrière hémato-encéphalique, ou hémo-encéphalique, ou hémato-méningée est une barrière physiologique présente dans le cerveau chez tous les tétrapodes (vertébrés terrestres), entre la circulation sanguine et le système nerveux central (SNC). Elle sert à réguler le milieu (homéostasie) dans le cerveau, en le séparant du sang. Les cellules endothéliales, qui sont reliées entre elles par des jonctions serrées et qui tapissent les capillaires du côté du flux sanguin sont les composants essentiels de cette barrière.

La barrière hémato-encéphalique protège le cerveau des agents pathogènes, des toxines et des hormones circulant dans le sang. Elle représente un filtre extrêmement sélectif, à travers lequel les aliments nécessaires au cerveau sont transmis, et les déchets sont éliminés. Ce processus d'alimentation et d'élimination est produit par toute une série de mécanismes de transport actif.

D'autre part, cette fonction de protection du cerveau complique le traitement médicamenteux d'un grand nombre de maladies neurologiques, car de nombreuses molécules actives ne peuvent pas traverser la barrière hémato-encéphalique. La recherche sur la manière de surmonter la barrière hémato-encéphalique est tout à fait actuelle. Bien peu de maladies – rares en plus – sont spécifiques de la barrière hémato-encéphalique, tandis qu'elle peut être atteinte par de nombreuses maladies générales. Une atteinte, ou une lésion, de la barrière hémato-encéphalique est une complication à prendre très au sérieux.

Les premières expériences, qui ont indiqué l'existence de cette barrière ont été conduites par Paul Ehrlich en 1885. Mais il a mal interprété les résultats de ses expériences. La preuve définitive de l'existence de la barrière n'a été donnée qu'en 1967 par des recherches en microscopie électronique en transmission.

Fonctions de la barrière hémato-encéphalique

Vue par microscopie électronique en transmission d'une coupe mince du télencéphale d'un embryon de souris de 11 5 j. Dans la partie supérieure, en blanc, la lumière d'un capillaire. Les cellules endothéliales sont reliées par des jonctions serrées (lignes sombres). Plus bas, on voit les jonctions adhérentents. La largeur de l'image est d'envion 4 2 µm

Présentation schématique du tissu nerveux : 1) Épendyme, 2) Neurone, 3) Axone, 4) Cellule de Schwann, 5) Astrocyte, 6) Myéline, 7) Microglie, 8) Capillaire

Un réseau de capillaires fournit des aliments aux cellules nerveuses.

Chez l'homme, le cerveau représente environ 2% de la masse corporelle. Mais ses besoins en énergie sont environ de 20% du total. Contrairement aux autres organes du corps, le cerveau dispose de très peu de réserves en aliments et en oxygène. Et les cellules nerveuses ne sont pas capables de satisfaire leurs besoins en énergie de manière anaérobie, c'est-à-dire sans aucun apport d'oxygène élémentaire. C'est ainsi qu'une interruption de l’apport de sang au cerveau amène au bout de 10 s une perte de connaissance, et quelques minutes après, les cellules nerveuses commencent à mourir^[1]. Selon l’activité de chaque domaine du cerveau, ses besoins en énergie et ses réserves peuvent être très différents. Pour ajuster les apports aux besoins, chaque domaine est en mesure de régler par lui-même les apports sanguins qui lui sont nécessaires^[1].

Les fonctions complexes du cerveau sont liées à des processus électrochimiques et biochimiques très sensibles, qui ne peuvent se dérouler que dans un milieu interne homéostatique largement débarrassé de toutes perturbations. Par exemple, les oscillations du pH du sang (une mesure du caractère basique ou acide) ne doivent pas se répercuter sur le cerveau. Les variations de la concentration en potassium changeraient le potentiel de la membrane des cellules nerveuses. Les neurotransmetteurs emportés par le sang dans les vaisseaux ne doivent pas pénétrer dans le système nerveux central, car ils y perturberaient sérieusement le fonctionnement des synapses qui s'y trouvent. En plus, les neurones ne sont pas capables de se régénérer en cas de dommage dû à une variation du milieu^[1]. Enfin, le cerveau, organe de commande central, doit être protégé de l’influence de matières étrangères au corps, telles que par exemple des xénobiotiques, ou des agents pathogènes. L'imperméabilité considérable de la barrière hémato-encéphalique à l'égard des agents pathogènes, des anticorps et des leucocytes en fait une « barrière immunologique »^[2],[3].

Par ailleurs, en raison des besoins très importants en énergie du cerveau – par comparaison avec d'autres organes – des quantités de déchets biochimiques très importantes doivent être éliminées à travers la barrière hémato-encéphalique^[4].

Pour accomplir toutes ces fonctions (alimentation, élimination et homéostasie), le circuit des vaisseaux sanguins cérébraux des vertébrés présente, par comparaison avec les vaisseaux périphériques, toute une série de différences structurelles et fonctionnelles. Cette différenciation exerce une très large séparation du cerveau de l'espace extracellulaire environnant, et est une condition essentielle pour la protection du tissu neuronal sensible, et pour l'obtention d'un milieu interne stable^[1].

Les changements du fonctionnement de la barrière hémato-encéphalique provoquent des altérations du système nerveux central, et peuvent en provoquer des troubles fonctionnels ou des maladies^[4]. Par suite, une série de maladies neurologiques est reliée plus ou moins directement à la barrière hémato-encéphalique.

Anatomie de la barrière hémato-encéphalique

Article détaillé : Anatomie de la barrière hémato-encéphalique.

La barrière hémato-encéphalique. Dans le sens des aiguilles d'une montre, agrandissements successifs : cerveau, capillaire, barrière, endothélium

L'élément essentiel de la barrière hémato-encéphalique est constitué par les cellules endothéliales avec leurs jonctions serrées. Mais deux autres types de cellules sont également importants, tant du point de vue de la fonction que celui de la naissance et de la croissance de la barrière hémato-encéphalique : les péricytes et les astrocytes^[1]. Les interactions entre cellules endothéliales, péricytes et astrocytes sont plus étroites qu'entre tous autres types de cellules. Ces trois types de cellules forment ensemble la barrière hémato-encéphalique de la plupart des vertébrés, la barrière hémato-encéphalique cellulaire^[5],[6]. Il existe dans le règne animal d'autres types de barrière hémato-encéphalique, qui sont abordés dans l'article détaillé.

Endothélium

Les capillaires sont tapissés – comme les vaisseaux périphériques – de cellules endothéliales. Dans le cerveau, celles-ci ont une structure particulièrement étanche^[7]. le nombre des mitochondries est environ de 5 à 10 fois plus élevé que dans les capillaires périphériques, en raison de l'énergie nécessitée pour exercer un transport actif des nutriments nécessaires à travers les cellules^[8]. Les cellules endothéliales présentent sur leurs membranes une quantité d'aquaporines, canaux spécialisés pour le passage de l’eau, pour la régulation de la quantité d'eau au sein du cerveau.

L'étanchéité de la barrière peut être quantifiée par sa résistance électrique. Chez un rat adulte, la résistance monte à environ 2 000 Ω⋅cm². Dans les capillaires musculaires, elle n'est que d'environ 30 Ω⋅cm²^[9].

Jonctions serrées

De haut en bas : le sang, l'endothélium avec les jonctions serrées, puis jonctions adhérentes et cerveau. Abstraction est faite des péricytes et astrocytes.

Les cellules endothéliales sont liées ensemble par de solides liaisons, appelées jonctions serrées, qui rendent imperméable l'espace entre cellules. Plusieurs types de protéines membranaires les ceinturent afin d'assurer l'étanchéité.

Lame basale

Les cellules épithéliales sont entourées par une couche protéique, la lame basale^[10] épaisse de 40 à 50 nm, donc visible seulement au microscope électronique.

Péricytes

Les péricytes sont de petites cellules ovales, qui couvrent en tout 20% de la surface externe des capillaires, solidement amarrées aux cellules endothéliales. Elles jouent trois rôles principaux :

• Un rôle moteur permis par leur haut contenu en actine, et qui module la section du capillaire en fonction des besoins.
• Un rôle de macrophage, qui leur permet d'intervenir en seconde ligne de défense contre les agressions venant de la circulation sanguine.
• Un rôle de régulateur des divisions cellulaires et de la différenciation cellulaire des cellules endothéliales. Ils jouent notamment un rôle important lors de la formation de nouveaux vaisseaux (angiogenèse)^[11].

Astrocytes

Un astrocyte (vert) dans une culture de cellules

Les astrocytes sont des cellules en étoile, significativement plus grandes que les péricytes. Ils couvrent les capillaires du cerveau à 99% avec leurs pieds enchevêtrés en rosettes. L'interaction immédiate (20 nm) entre cellules endothéliales et astrocytes induit dans les deux sens les spécificités anatomiques^[12],[13].

Leurs fonctions principales sont :

• une modulation rapide de la perméabilité des cellules endothéliales,
• l'alimentation des neurones,
• la régulation du milieu extracellulaire,
• pour la myéline des gaines des axones neuronaux, la synthèse du cholestérol qui ne peut pas traverser la barrière hémato-encéphalique^[14]

Domaines du cerveau sans barrière hémato-encéphalique

Tous les capillaires du cerveau ne font pas partie de la barrière hémato-encéphalique : les parties du cerveau qui sécrètent des hormones et celles qui ont une fonction sensorielle sur la composition du sang doivent rester en communication avec la circulation sanguine.

On dénombre six organes circumventriculaires partiellement démunis de barrière hémato-encéphalique^[15]. Ces régions sont entourées de tanycytes, analogues aux épendymocytes qui séparent le cerveau du liquide cérébro-spinal remplissant l'épendyme, mais avec des jonctions serrées très étanches.

Autres informations

On consultera avec profit l'article détaillé pour des informations sur :

• Les données générales et statistiques sur la barrière hémato-encéphalique
• Les phases du développement de la barrière chez le fœtus et le nouveau-né
• Des perspectives sur l'évolution de la barrière chez les vertébrés supérieurs, et les paradoxes qu'elle présente.

Barrière sang-liquide cérébro-spinal

Outre la barrière hémato-encéphalique, il existe une deuxième barrière entre la circulation sanguine et le système nerveux central : la barrière sang-LCS. Cette barrière est formée par les cellules épithéliales et les jonctions serrées des plexus choroïdes^[16],[17]. La barrière sang-LCS a aussi une part de l'homéostasie du cerveau. Elle l'approvisionne en vitamines, en nucléotides et en glucose. La contribution au transport de matières vers le cerveau est en fin de compte assez faible, et totalement inusffisante pour couvrir les besoins du cerveau en aliments et oxygène. La surface d'échange que forment les capillaires intracérébraux de la barrière hémato-encéphalique représente 5 000 fois celle des plexus choroïdes.

Outre ces deux barrières, si importantes pour le système nerveux central, on trouve dans le corps d'autres barrières ultrasélectives analogues, qui contrôlent l'échange de matières avec le sang. Parmi d'autres, ce sont :

• La barrière système nerveux central-liquide cérébrospinal assurée principalement par les épendymocytes et autres cellules des plexus choroïdes. Les astrocytes assurent la communication entre les deux barrières par différents types de pieds.
• la barrière sang-placenta
• la barrière entre le sang et les tubes séminifères assurée par des jonctions serrées entre cellules de Sertoli
• la barrière entre sang et urine, assurée par à la fois par une limitation en taille des molécules pouvant traverser, et par une charge électrique négative des membranes, repoussant les protéines du sang ;
• la barrière entre sang et thymus, destinée à protéger les lymphocytes-T de tout contact avec des antigènes pendant leur maturation. Elle est effectuée par une succession de cinq couches différentes de cellules dans la paroi des capillaires
• la barrière des poumons : sang et air ne sont séparés que par deux couches de cellules, l'endothélium des capillaires et l'épithélium des Poumon#Alvéoles, partageant la même lame basale.

Processus de transport à la barrière hémato-encéphalique

Article détaillé : Transport à la barrière hémato-encéphalique.

La barrière hémato-encéphalique doit assurer, malgré son étanchéité, le transport d'aliments et d'oxygène vers le cerveau, et éliminer les déchets.

Transport paracellulaire

Pour éviter toute fuite incontrôlée, les cellules endothéliales sont liées par des jonctions serrées étanches. Seules de toutes petites molécules peuvent passer à travers les jonctions serrées : eau, glycérine ou urée^[18].

Diffusion libre

Représentation schématique des processus de diffusion à la membrane cellulaire, à trois instants : la concentration tend à s'égaliser.

La forme la plus simple est la diffusion libre ou passive, qui tend à établir un équilibre de concentration ou de potentiel chimique des substances. Elle ne requiert aucune énergie. Le débit est proportionnel à la différence de potentiel et n'est pas contrôlable^[19].

Les petites molécules peuvent franchir la membrane par des trous correspondant à des déformations locales des chaînes de phospholipides constituant la membrane. Les trous sont mobiles, et peuvent donc accompagner la molécule dans son trajet à travers la membrane^[20]. Encore faut-il que la molécule en question ait une affinité raisonnable pour les lipides. Ce processus ne concerne donc essentiellement que les petites molécules lipophiles (hydrophobes).

Passage par canaux

Représentation schématique du transport facilité (les trois figures de droite). À gauche, en comparaison un transport par canal.

Les petites molécules polaires, comme l'eau, ne peuvent pratiquement pas diffuser à travers les membranes par le processus décrit. On trouve dans la membrane cellulaire un grand nombre de protéines qui jouent le rôle de canaux spécialisés pour le passage de l'eau : les aquaporines. Elles offrent une grande perméabilité à l'eau, dans les deux sens selon la différence de pression osmotique^[21]. Il existe de nombreux autres types de canaux, plus ou moins spécialisés, qui peuvent être ouverts ou fermés sous l'influence d'agents physiques. Mais tous ces canaux partagent la propriété de passivité : quand ils sont ouverts, ils laissent passer les molécules appropriées dans le sens de l'équilibre des concentrations.

Diffusion facilitée

Des molécules vitales comme le glucose et certains acides aminés ne peuvent pas passer par des canaux. Il existe alors des transporteurs membranaires adaptés aux divers molécules nécessaires. Les protéines membranaires de transport peuvent fonctionner comme uniport (une molécule à la fois), comme symport (deux molécules ou plus dans le même sens) ou comme antiport (deux molécules ou plus en sens contraires)^[22].

Transport actif

Les transports décrits ci-dessus ne nécessitent de la part de la cellule aucune contribution énergétique. Mais il existe des substances qui doivent être transportées contre le gradient de concentration. Ceci nécessite alors une consommation d'énergie pour actionner des systèmes de transport actif ou « pompes ». Le transport du sang vers le cerveau est nommé « influx », et en sens inverse « efflux ». Certains de ces mécanismes sont très spécifiques, et identifient les molécules par leur forme, et distinguent donc les formes énantiomères gauche et droite. Par exemple, la D-asparagine est un ingrédient nécessaire pour la formation de certaines hormones. Elle bénéficie donc d'un transporteur actif d'influx. Par contre, la L-asparagine est un acide aminé stimulant dont l’accumulation dans le cerveau serait délétère. Elle est donc éliminée par un transport actif d'efflux.

Les transporteurs actifs d'efflux sont souvent peu spécifiques, leur rôle étant d'éliminer des déchets de nature parfois imprévisible.

Tous les types de transport pour tous les substrats n'ont pas encore été clairement identifiés.

Transport vésiculaire

Comparaison entre phagocytose, pinocytose et endocytose à récepteurs.

Les grosses molécules, ou même agrégats, qui ne peuvent pas utiliser de protéine membranaire de transport sont incorporées dans la cellule endothéliale par endocytose : la membrane plasmique se déforme en puits autour de l'objet à incorporer, puis la margelle du puits se soude, et la membrane recouvre son intégrité, tandis que l'objet est enfermé dans une vésicule. La vésicule peut traverser la cellule et s'ouvrir sur la face opposée par un mécanisme inverse, et libérer son contenu, c'est la transcytose.

• Transcytose à récepteurs.

S'il y a au puits de la membrane, des récepteurs qui se lient spécifiquement à la molécule visée, la vésicule est marquée, transportée et vidée. C'est le cas pour de grosses molécules comme la Lipoprotéine de basse densité (LDL), ingrédient de fabrication du cholestérol^[23], l'insuline^[24], et d'autres hormones peptidiques.

• Transcytose par adsorption

Dans ce cas, la sélection se fait par la charge : le puits absorbe les molécules positivement chargées (les cations), d'où l'autre dénomination de « transport cationique ». Elle permet un plus grand débit que la transcytose à récepteurs.

Principaux transporteurs

On consultera à ce sujet la table des principaux transporteurs.

Mesure et représentation de la perméabilité de la barrière hémato-encéphalique

Article détaillé : Perméabilité de la barrière hémato-encéphalique.

Comme il est indiqué dans la section précédente, les processus de transport de substrats à travers la barrière hémato-encéphalique sont très variés, tant dans la nature du ou des substrats à transporter que dans le sens même où s'effectue le transport. Or il est essentiel pour la médecine et la pharmacie de savoir comment faire pénétrer dans le cerveau des médicaments (psychotropes) ou comment empêcher des toxiques, par exemple destinés à d'autres organes, d'y pénétrer^[25].

La manière la plus classique est de procéder à des essais in vivo, sur l’animal, puis sur l'homme (« essais cliniques »), mais on peut recourir de façon plus aisée à des essais in vitro, voire à des simulations in silico^[26].

Bases physiques

Un modèle simplifié, basé sur un seul capillaire a été mis au point par Renkin (1959) et Crone (1965)^[27]. Le résultat s'exprime comme le « produit perméabilité-surface PS » de l’échantillon de capillaire. Il détermine la fraction E extraite en un passage d'une quantité de sang Q :

$\scriptstyle E = 1 - e^{-{\frac{PS}{Q}}}$ ^[28].

Pour E < 0,2, la perméabilité est le facteur limitant, autrement elle est modérée ou grande.

Procédés in vitro

Le procédé le plus simple et le plus réaliste est l'utilisation de vaisseaux isolés, qui restent vivants pour un certain temps^[29].

Avec des lignées de cellules endothéliales immortalisées, cultivées en couches simples, on peut faire des essais quantitatifs^[30]. La qualité de ces couches, celle des jonctions serrées, se mesure par leur résistance électrique, qui doit être aussi élevée que possible. Dans l'organisme vivant, elle peut être de l’ordre de 2 000 Ω⋅cm². Dans une culture mixte d'astrocytes et de cellules épithéliales^[31], elle peut monter à 800 Ω⋅cm².

Procédés in vivo

Les rats de laboratoire sont des organismes modèles très utilisés pour les expériences in vivo sur la barrière hémato-encéphalique.

Le premier procédé a été l'injection de colorants suivie de l'examen anatomique de l'animal. Le colorant franchissant la barrière hémato-encéphalique laisse une trace tenace. Ceci permet d'étudier des lésions volontaires de la barrière^[32].

Les procédés in vivo sont irremplaçables pour leur sensibilité aux conditions physiologiques, le temps pendant lequel on peut les laisser agir et le nombre de passages du sang à travers le réseau capillaire.

Indice d'absorption cérébrale

Le rapport entre les taux d'absorption d'une substance à tester et une substance facilement absorbée, toutes deux marquées radioactivement donne l'indice d'absorption cérébrale (Brain Uptake Index ou BUI). Cette méthode ne s'applique qu'à des substances rapidement absorbées. Voir la table pour quelques substances courantes.

Indice d'efflux cérébral

Il est également intéressant de connaître pour chaque substrat les propriétés d'efflux de la barrière hémato-encéphalique. On compare le substrat testé à une matière de référence, peu capable de sortir de la barrière, toutes deux marquées radioactivement. Elles sont microinjectées directement dans le cerveau. L'indice d'efflux cérébral (Brain Efflux Index ou BEI) se calcule en fonction de ce qui reste de chacune des matières par rapport à ce qui a été injecté^[33].

Perfusion cérébrale

Dans la méthode de perfusion, le substrat marqué est longuement perfusé dans la carotide. Puis l'animal est sacrifié et la radioactivité du cerveau mesurée. Délicate, elle est réservée à des cas de BEI très faibles.

Il est intéressant de séparer les capillaires par centrifugation avant la mesure, afin d'éliminer tout le substrat qui lui est encore lié^[34].

Technique de diffusion d'indicateur

Dans cette technique, la substance de référence doit être incapable de traverser la barrière hémato-encéphalique. Le substrat à tester et la référence ne sont pas marqués radioactivement. Ils sont infusés dans la carotide, et dosés dans le sang de retour (veine jugulaire interne). Le dosage des matières permet le calcul de la quantité de substrat absorbée. Cette technique par différence ne convient donc que pour des substrats franchissant facilement la barrière^[35].

Autoradiographie quantitative

Voir dans le Wikilivre sur la photographie, les articles spécialisés sur l'autoradiographie et la fluorographie.

Autoradiogramme d'une coupe sagittale d'un cerveau d'embryon de rat.

La figure ci-contre présente une autoradiographie d'un cerveau d'embryon de rat. Les domaines radioactifs sont foncés (zone subventriculaire SVZ). Le trait noir donne l'échelle de 2 mm.

Cette technique consiste en injection intraveineuse de substance marquée au carbone-14. Les organes sont disséqués, tranchés au microtome et déposés sur du film à rayons X. Connaissant la quantité de marqueur, on peut en déduire le produit perméabilité-surface de l’échantillon^[27].

Microdialyse intracérébrale

On implante dans le tissu nerveux une membrane hémiperméable. Par un microcathéter, on perfuse des substances, et/ou recueille le liquide interstitiel, éventuellement en continu^[36].

En médecine humaine, la microdialyse intracérébrale est utilisée pour le monitoring neurochimique en cas d'accident vasculaire cérébral.

Procédés d'imagerie

L'activité de la barrière hémato-encéphalique, le débit des capillaires, sont liés à l'activité du tissu nerveux qu'ils alimentent. On a donc une interaction entre ces trois grandeurs, qui peuvent varier substantiellement à l’échelle globale du cerveau. Ceci mène à dresser de façon non invasive des images globales du cerveau, essentiellement par trois méthodes qui se complètent : la tomographie par émission de positons (TEP), l'imagerie par résonance magnétique (IRM) et la spectroscopie par résonance magnétique (SRM).

• La tomographie par émission de positons

Article détaillé : Tomographie par émission de positons.

TEP du cerveau après saturation par le 2-¹⁸fluor-2-deoxy-D-glucose (FDG). Le FDG est transporté au cerveau comme le D-glucose normal par le GLUT-1 (transport passif). Les domaines avec les besoins les plus élevés en glucose sont en rouge.

La méthode repose sur des molécules marquées par un émetteur bêta⁺ : carbone-11 ou fluor-18. Le positon émis s'arrête dans la matière dense, et s'annihile avec un électron, donnant une paire de rayons gamma opposés. Le point de désintégration se situe donc sur la ligne joignant les points de détection des gammas. On peut ainsi, avec assez de désintégrations, reconstituer par le calcul la densité des molécules marquées.

En raison de la courte demi-vie des émetteurs bêta⁺, cette méthode ne peut être utilisée qu'auprès de centres dotés de cyclotrons capables de fabriquer ces nucléides, et de laboratoires en mesure de les incorporer aux molécules à marquer.

• Imagerie par résonance magnétique (IRM)

Spectroscopie par résonance magnétique d'une zone donnée dans le cerveau d'un patient. Les trois images IRM montrent le territoire étudié (entouré en turquoise). On voit les spectres NMR, avec le pic du glutathion (GSH). Les surfaces (axe des Y) y sont portés en fonction de la concentration en GSH (axe des X)^[37].

L'imagerie par résonance magnétique est trop peu sensible pour représenter le passage de substances actives à travers une barrière hémato-encéphalique saine. En cas de lésion, l’IRM avec produit de contraste joue un grand rôle.

• Spectroscopie par résonance magnétique (SRM)

La SRM est une version de l'IRM où l'on fait continûment varier la fréquence pour exciter successivement divers noyaux, et donc leur réponse, ce qui se manifeste par un spectre avec des pics caractéristiques : fluor-19, carbone-13, phosphore-31, et hydrogène dans d'autres substances que l'eau. Les signaux très faibles nécessitent de longs temps de mesure et la mesure sur des volumes appréciables^[36],[38].

Stratégies pour surmonter la barrière hémato-encéphalique

Article détaillé : Stratégies pour franchir la barrière hémato-encéphalique.

Comme il a été indiqué dans la section Processus de transport à la barrière hémato-encéphalique, il n'y a que peu de substances capables de franchir la barrière hémato-encéphalique, ce pourquoi beaucoup de médicaments psychotropes finissent par échouer à la barrière. 98% de ces substances ne peuvent pas traverser la barrière hémato-encéphalique^[39].

Il y a donc des dizaines d'années que l'on travaille intensément sur des méthodes susceptibles de rendre possible un transport de substance active dans le cerveau, en contournant – ou mieux en franchissant sélectivement – la barrière hémato-encéphalique^[40],[41]. Un ensemble de stratégies pour surmonter la barrière hémato-encéphalique ont été mises au point dans ce but, ou en sont encore au stade d'élaboration^[42],[43].

Dysfonctionnements de la barrière hémato-encéphalique

Les dysfonctionnements de la barrière hémato-encéphalique peuvent être provoquées par toutes sortes de pathologies. La barrière elle-même peut d'ailleurs être par elle-même à l'origine de quelques maladies neurologiques très rares, de nature génétique.

Les perturbations du rôle protecteur de la barrière hémato-encéphalique sont une complication de beaucoup de maladies neurodégénératives et de blessures du cerveau. Certaines maladies périphériques, comme le diabète, ou certaines inflammations, ont une action nuisible sur le fonctionnement de la barrière hémato-encéphalique^[44].

D'autres pathologies peuvent perturber le fonctionnement des endothéliums « du dedans vers le dehors », c'est-à-dire que des influences provenant de la matrice extracellulaire perturbent l'intégrité de la barrière hémato-encéphalique. Par exemple, on a le glioblastome^[45].

Mais un ensemble de maladies se manifestent dans le cerveau par le fait que certains agents peuvent pénétrer dans la barrière hémato-encéphalique. Parmi ceux-ci par exemple, le VIH, le Virus T-lymphotropique humain, le Virus du Nil occidental, certaines bactéries comme le méningocoque ou le vibrion cholérique^[45].

Dans le cas de la sclérose en plaques, les agents pathogènes sont des cellules du système immunitaire de l'individu lui-même, qui franchissent la barrière hémato-encéphalique. De même, dans certains cancers non-cérébraux, certaines cellules en métastase peuvent franchir la barrière hémato-encéphalique et donner lieu à des métastases cérébrales^[45].

Agressions exogènes de la barrière hémato-encéphalique

Alcool

La consommation excessive d'alcool est un facteur majeur de risque pour les maladies psychophysiologiques, les inflammations et la sensibilité aux infections bactériennes. En plus, la consommation chronique d'alcool endommage la barrière hémato-encéphalique^{[46],[47],[48]}, ce qui est considéré comme un facteur important pour l'amorce de maladies neurodégénératives^[49]. Les dommages à la barrière hémato-encéphalique sont démontrés aussi bien par les recherches neuropathologiques sur les alcooliques que par des expériences sur des animaux^[50].

Dans les expériences sur animaux, il a été établi que l'enzyme Myosin light-chain kinase (en) (MLCK) conduit dans l'endothélium à la phosphorylation de nombreuses protéines des jonctions serrées ou du cytosquelette des protéines, ce qui endommage l’intégrité de la barrière hémato-encéphalique^[51]. En outre, le stress oxydant dû à l'alcool conduit à des dommages supplémentaires à la barrière hémato-encéphalique^[52].

Ce n'est pas l’alcool lui-même qui active l'enzyme MLCK dans l'endothélium, mais ses métabolites.

La dégradation fonctionnelle de la barrière hémato-encéphalique facilite la migration des leucocytes dans le cerveau, ce qui facilite le développement de pathologies neuro-inflammatoires^[50].

Nicotine

L'abus chronique de nicotine fait non seulement augmenter le risque de cancer des poumons, mais aussi celui de maladie cardio-vasculaire. Parmi les risques cardio-vasculaires, il faut compter une corrélation immédiate avec les risques de démence. Dans plusieurs méta-analyses, il a été établi que les fumeurs ont un risque significativement plus élevé de démence par maladie d'Alzheimer que les non-fumeurs. Le risque de démence vasculaire, ou de déficit cognitif léger n'est pas ou que peu augmenté^[53]. L'exposition quotidienne à la nicotine modifie chez les animaux non seulement la fonction mais aussi la structure de la barrière hémato-encéphalique des sujets^[54]. La substance modèle sucrose peut passer à travers les endothéliums significativement plus facilement, ce qui traduit en réalité une distribution modifiée des protéines de jonction serrée ZO-1^[55], et une activité réduite de la claudine-3^[56].

De plus, après une administration chronique de nicotine, on a constaté dans l'endothélium une formation renforcée de microvillosités, de symport Na⁺/K⁺/2Cl^- et pompe sodium-potassium déréglés^[54].

Dans les études épidémiologiques, il a été aussi montré que les fumeurs courent un risque significativement plus élevé en ce qui concerne la méningite bactérienne, par rapport aux non-fumeurs. La nicotine change les filaments d'actine du cytosquelette, ce qui facilite apparemment le passage d'agents pathogènes comme le colibacille vers le cerveau^[57].

Pour certains composés à diffusion limitée, comme par exemple l'antagoniste de la nicotine methyllycaconitine (en), qui se fixe sur le récepteur nicotinique à l'acétylcholine (nACHrs), et auquel on attribue des vertus pour le sevrage nicotinique, le passage de la barrière hémato-encéphalique devient plus difficile^[58].

On travaille à la mise au point d'un vaccin sur la base d'une immunoglobuline G. Avec ce vaccin, on devrait stimuler des anticorps qui se lient spécifiquement à la nicotine, et par suite empêchent son passage à travers la barrière hémato-encéphalique^{[59],[60],[61],[62]}.

Ondes électromagnétiques (téléphones mobiles)

Les effets adverses sur la santé des rayonnements électromagnétiques dans le domaine du MHz au GHz à haute densité d'énergie sont bien connus. C'est avec eux que l'on fait cuire la nourriture au four à micro-ondes. Cependant, les effets de ce rayonnement avec une densité bien moindre, comme celle utilisée en téléphonie ou application multimédia mobiles, sont sujets à controverse. Les effets spécifiques sur la barrière hémato-encéphalique sont un domaine d'incertitude^[63].

À haute densité d'énergie du rayonnement électromagnétique, on observe un échauffement significatif du tissu corporel. Dans le crâne, ce réchauffement pourrait influencer la barrière hémato-encéphalique et la rendre plus perméable. On observe ce genre d'effets au réchauffement d'organes périphériques^[64]. Dans les circonstances de la téléphonie mobile, le cerveau s'échauffe au maximum de 0,1 K (15 minutes de conversation à puissance d'émission maximum). Un bain chaud ou un travail corporel fatigant peuvent échauffer plus fort le cerveau sans danger^[65]. Dans les études scientifiques depuis le début des années 1990^[66], en particulier dans le groupe du neurochirurgien suédois Leif G. Salford de l'université de Lund, on a obtenu des résultats rapportant une ouverture de la barrière hémato-encéphalique dans le domaine non-thermique avec des fréquences GSM^{[67],[68],[69],[70]}.

D'autres groupes de travail ne peuvent pas confirmer les résultats de Salford^[71],[16], dont certains remettent en cause la méthode de travail utilisée elle-même^[16].

Diagnostics en médecine humaine

IRM renforcée par produit de contraste

Gd-DTPA ne peut pas passer une barrière hémato-encéphalique saine, en raison de son caractère très hydrophile.

IRM coronale avec 20 ml de Gd-DTPA sur un glioblastome. Le domaine de la tumeur est rendu visible par l'entrée du produit de contraste à travers la partie lésée de la barrière hémato-encéphalique de l'hémisphère cérébral droit (régions claires, à gauche sur l’image).

Le même patient avec vue sagittale du cerveau.

Le premier produit de contraste mis au point pour l'IRM est le gadolinium (Gd). En raison de sa toxicité, il faut l’emballer (le chélater) dans une molécule de DTPA. On a ainsi obtenu en 1984 le Gd-DTPA^[72], qui avait le potentiel pour obtenir des IRM renforcés pour le diagnostic de lésions locales de la barrière hémato-encéphalique^[73]. La molécule de Gd-DTPA est très polaire, et par conséquent bien trop hydrophile pour traverser une barrière hémato-encéphalique saine. Les modifications des jonctions serrées, comme celles qui peuvent par exemple être provoquées par un glioblastome, permettent le transport paracellulaire de ce produit de contraste dans le tissu cérébral. Là, il renforce le contraste, par interaction avec les protons de l'eau environnante, et rend visibles les défauts de la barrière hémato-encéphalique. Comme ce sont les vaisseaux responsables de l'alimentation de la tumeur qui sont touchés, dans son voisinage immédiat, on peut en apprécier l'extension.

Au cas d'un accident vasculaire cérébral aigu, le dommage à la barrière hémato-encéphalique peut être soumis au diagnostic de la même manière par IRM renforcée par produit de contraste^[74].

Par la détermination du temps de relaxation, la quantité de Gd-DTPA dans le tissu cérébral peut être quantifiée^[75].

Autres procédés d'imagerie

Au moyen de traceurs marqués par un élément radioactif, qui ne passent pas normalement à travers la barrière hémato-encéphalique, on peut aussi entreprendre des recherches sur le fonctionnement de celle-ci chez l'homme. Pour cela, on peut en principe utiliser la tomographie d'émission monophotonique (TEMP, ou en anglais SPECT), ou la tomographie par émission de positons (TEP, ou en anglais PET).

Par exemple, chez des patients victimes d'un accident vasculaire cérébral aigu, on peut montrer une augmentation de l'absorption du ^99mTc chélaté par l'hexa-methyl-propylene-amine-oxime (HMPAO)^[76],[77].

Au moyen de la tomodensitométrie, on peut aussi quantifier les défauts de la barrière hémato-encéphalique par la diffusion de produits de contraste appropriés hors des capillaires^{[78],[79],[80]}.

Histoire de la découverte de la barrière hémato-encéphalique

Max Lewandowsky

La première preuve d'existence pour la barrière hémato-encéphalique vient du chimiste allemand Paul Ehrlich. En 1885, il constata qu'après injection de colorants vitaux solubles dans l'eau dans la circulation sanguine de rats, tous les organes étaient colorés, sauf le cerveau et la moelle épinière^[81].

En 1904, il en tira une conclusion fausse, c'est-à-dire que la cause de cette découverte était une faible affinité du tissu cérébral pour le colorant injecté^[82].

En 1909, Edwin Goldmann, un ancien collaborateur de Paul Ehrlich, injecte par intraveineuse le colorant sythétisé cinq ans auparavant par Ehrlich, le bleu de trypan, un colorant azoïque. Là-dessus, il remarque que le plexus choroideus, contrairement au tissu cérébral qui l'entoure, est coloré de façon marquée^[83]. En 1913, il injecte la même substance directement dans le liquide cérébro-spinal de chiens et lapins^[84]. Goldmann en conclut que le liquide cérébro-spinal et le plexus choroideus ont une fonction importante dans le transport des nutriments du système nerveux central. De plus, il soupçonne une fonction de barrière contre les substances neurotoxiques^[34].

En 1898, Arthur Biedl et Rudolf Kraus mènent des expériences avec l’acide gallique. Ce composé se révèle non-toxique par application dans la circulation générale. Mais son injection dans le cerveau s'avère neurotoxique, avec des réactions pouvant aller jusqu'au coma^[85].

Max Lewandowsky utilise en 1900 pour des expériences semblables le ferrocyanure de potassium et arrive à des conclusions semblables à celles de Biedl et Kraus. Lewandowsky utilise à cette occasion pour la première fois le concept de « barrière hémato-encéphalique »^[86],[87].

Charles Smart Roy et Charles Scott Sherrington en 1893 à Cambridge

En 1890, Charles Smart Roy et le futur prix Nobel de médecine Charles Scott Sherrington postulent que le cerveau possède un mécanisme intrinsèque pour faire correspondre l'irrigation vasculaire aux variations locales de l'activité :

« Le cerveau posssède un mécanisme intrinsèque par lequel l'apport vasculaire peut être varié localement en correspondance avec les variations locales d'activité fonctionnelle^[88],[89]. »

Lina Stern, le premier membre féminin de l'académie des sciences de Russie, a apporté de réelles contributions à la recherche sur la barrière hémato-encéphalique, qu'elle désigna comme telle en 1921^[90].

La différence entre la barrière hémato-encéphalique et la barrière sang-liquide cérébro-spinal fut prise en compte dans les années 1930 par Friedrich Karl Walter^[91] et Hugo Spatz^[92]. Ils ont posé que le flux de liquide cérébro-spinal était par lui-même insuffisant pour assurer l'échange de gaz du système nerveux central^[34].

Bien que les expériences de Goldmann et Ehrlich eussent indiqué l'existence d'une barrière entre la circulation sanguine et le système nerveux central, ce n'est que dans les années 1960 que les derniers doutes concernant son existence ont été dissipés. Un point critique dans l'expérience de Goldmann consistait en ce que le sang et le liquide cérébro-spinal, les deux liquides dans lesquels il avait injecté des colorants, diffèrent considérablement, ce qui pouvait influer sur le comportement de la diffusion et l'affinité pour le tissu nerveux. La compréhension a été rendue encore plus difficile par la trouvaille expérimentale que les colorants azoïques basiques coloraient le tissu nerveux, donc franchissaient la barrière, tandis que les colorants acides ne le faisaient pas. Ulrich Friedemann en conclut que c'étaient les propriétés électrochimiques des colorants qui en étaient responsables : les capillaires cérébraux étaient perméables aux substances neutres ou de pH supérieur au sang, et imperméables aux autres^[93]. Mais par la suite, quand un grand nombre de substances furent testées pour leur capacité à franchir la barrière hémato-encéphalique, cette hypothèse se révéla insuffisante. Dans les modèles d'explication suivants, on introduisit et soumit à discussion tout une série de paramètres, comme la masse molaire, la taille de la molécule, les affinités de liaison, les constantes de dissociation, le caractère lipophile, la charge électrique, et leurs diverses combinaisons^[94],[87].

La compréhension actuelle de la structure de base de la barrière hémato-encéphalique est fondée sur des vues au microscope électronique de cerveaux de souris, que l'on arriva à faire à la fin des années 1960^[95],[96]. Thomas S. Reese et Morris J. Karnovsky ont injecté à leurs sujets animaux pendant leurs expériences de la peroxydase de raifort (HRP) par voie intraveineuse. Ils n'ont trouvé l'enzyme, au microscope électronique, que dans la lumière des capillaires et dans des vésicules micropinocytaires au sein des cellules endothéliales. Â l'extérieur des endothéliums, dans la matrice extracellulaire, ils n'ont pas trouvé de peroxydase. Ils en ont conclu que les jonctions serrées entre les cellules endothéliales empêchent le passage vers le cerveau^[97],[1].

Références

Bibliographie

• (de) Cet article est partiellement ou en totalité issu de l’article de Wikipédia en allemand intitulé « Blut-Hirn-Schranke » (voir la liste des auteurs)
• Extraits du cours de PCEM1 du Pr Bertrand Bloch (PU-PH) sur le tissu nerveux, Université Victor Segalen, Bordeaux 2.
• (en) D. Kobiler, Blood-brain Barrier., Springer Verlag, 2001 (ISBN 0-306-46708-9) 
• (en) A. G. De Boer et W. Sutanto, Drug Transport Across the Blood-brain Barrier., CRC Press, 1997 (ISBN 90-5702-032-7) 
• (en) W. M. Pardridge, Introduction to the Blood-brain Barrier., Cambridge University Press, 1998 (ISBN 0-521-58124-9) 
• (en) E. M. Taylor, Efflux Transporters and the Blood-brain Barrier., Nova Publishers, 2005 (ISBN 1-59454-625-8) 
• (en) D. J. Begley, The Blood-brain Barrier and Drug Delivery to the CNS., Informa Health Care, 2000 (ISBN 0-8247-0394-4) 
• (en) E. de Vries et A. Prat, The Blood-brain Barrier and Its Microenvironment., Taylor & Francis, 2005 (ISBN 0-8493-9892-4) 
• (en) M. Bradbury, The Concept of a Blood-Brain Barrier., Wiley-Interscience, 1979 (ISBN 0-471-99688-2) 
• (de) P. Ramge, Untersuchungen zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke mit Hilfe von Nanopartikeln., Shaker Verlag, 1999 (ISBN 3-8265-4974-0) 
• (de) Peter Uwe Brenner, « Die Struktur der Blut-Hirn- und der Blut-Liquor-Schranke. – Eine Literaturstudie – », dans Thèse de doctorat, Ludwig Maximilans Universität München, 2006 [texte intégral (page consultée le 19 mai 2010)] 

Voir aussi

Articles connexes

• Méninge
• Classement thématique des neurosciences

Références

1. ↑ ^{a, b, c, d, e et f} (de) Sabine Wolf, Bernhard Seehaus, Klaus Minol et Hans Günter Gassen, « Die Blut-Hirn-Schranke : Eine Besonderheit des cerebralen Mikrozirkulationssystems. », dans Naturwissenschaften, Springer, vol. 83, 83, p. 302–311 [résumé, lien DOI (pages consultées le 20 février 2010)] 
2. ↑ (en) Werner Risau, Britta Engelhardt et Hartmut Wekerle, « Immune function of the blood-brain barrier: in complete presentation of protein (auto-)antigens by rat brain microvascular endothelium in vitro. », dans The Journal of Cell Biology, vol. 110, 1990, p. 1757–1766 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 28 avril 2010)] 
3. ↑ (de) Björn Bauer, « In vitro Zellkulturmodelle der Blut-Hirn-Schranke zur Untersuchung der Permeation und P-Glykoprotein-Interaktion von Arzneistoffen. », dans Dissertation, Ruprecht-Karl-Universität Heidelberg, 2002 [texte intégral (page consultée le 29 avril 2010)] 
4. ↑ ^{a et b} (en) Sumio Ohtsuki, « New Aspects of the Blood–Brain Barrier Transporters; Its Physiological Roles in the Central Nervous System », dans Biol. Pharm. Bull., vol. 27, 2004, p. 1489–1496 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 28 avril 2010)]  (article de revue)
5. ↑ (en) M. Bundgaard et N. J. Abbott, « All vertebrates started out with a glial blood-brain barrier 4-500 million years ago. », dans Glia, n^o 56, 2008, p. 699–708 [lien PMID (page consultée le 28 avril 2010)] 
6. ↑ (en) W. M. Pardridge, « Molecular biology of the blood–brain barrier. », dans Mol. Biotechnol., vol. 30, 2005, p. 57–69 [lien PMID (page consultée le 28 avril 2010)]  (article de revue)
7. ↑ (en) J. C. Lee, « Evolution in the concept of the blood-brain barrier phenomenon. », dans Progress in neuropathology, 1971, p. 84–145 (ISBN 0-88167-188-6) 
8. ↑ (en) Y. Takakura, K.L. Audus et R.T. Borchardt, « Blood-brain barrier: transport studies in isolated brain capillaries and in cultured brain endothelial cells. », dans Adv. Pharmacol., vol. 22, 1991, p. 137–165 [lien PMID (page consultée le 29 avril 2010)]  (article de revue)
9. ↑ (en) Arthur M. Bott, Hazel C. Jones et N. Joan Abbot, « Electrical resistance across the blood-brain barrier in anaesthetized rats: a developmental study. », dans J. Physiol., vol. 429, 1990, p. 47–62 [lien PMID (page consultée le 29 avril 2010)] 
10. ↑ (de) M. Pavelka et J. Roth, Funktionelle Ultrastruktur., Springer Verlag (ISBN 3-211-83563-6), p. 234–235 
11. ↑ (en) Britta Engelhardt, « Development of the blood-brain barrier. », dans Cell Tissue Res., Springer Verlag, vol. 314, 2003, p. 119–129 [lien PMID (page consultée le 1^er mai 2010)]  (article de revue)
12. ↑ (en) Jochen Neuhaus, Werner Risau et Hartwig Wolburg, « Induction of blood-brain barrier characteristics in bovine brain endothelial cells by rat astroglial cells in transfilter coculture. », dans Ann. N. Y. Acad. Sci., Wiley, vol. 633, 1991, p. 578–580 [lien PMID (page consultée le 1^er mai 2010)] 
13. ↑ (en) N. Joan Abbott, Lars Rönnbäck et Elisabeth Hansson, « Astrocyte-endothelial interactions at the blood-brain barrier. », dans Nat. Rev. Neurosci., vol. 7, 2006, p. 41–53 [lien PMID (page consultée le 2 mai 2010)]  (article de revue)
14. ↑ (en) Ingemar Bjorkhem et Steve Meaney, « Brain Cholesterol: Long Secret Life Behind a Barrier. », dans Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., vol. 24, 2004, p. 806–815 [lien PMID (page consultée le 2 mai 2010)]  (article de revue)
15. ↑ (en) Henri M. Duvernoy et Pierre-Yves Risold, « The circumventricular organs: an atlas of comparative anatomy and vascularization. », dans Brain Res. Rev., Elsevier, vol. 56, 2007, p. 119–147 [lien PMID (page consultée le 2 mai 2010)]  (article de revue)
16. ↑ ^{a, b et c} (de) N. Hettenbach, « Einfluss chronischer elektromagnetischer Befeldung mit Mobilfunkstrahlen (GSM und UMTS) auf die Integrität der Blut-Hirn-Schranke von Ratten. », dans Dissertation, Ludwig-Maximilians-Universität München, 2008 
17. ↑ (en) S. I. Rapoport, Blood-brain Barrier in Physiology and Medicine., Raven Press, 1976 (ISBN 0-89004-079-6) 
18. ↑ (de) Ines Sauer, « Apolipoprotein E abgeleitete Peptide als Vektoren zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke. », dans Thèse de doctorat, Freie Universität Berlin, 2004 [texte intégral (page consultée le 4 mai 2010)] 
19. ↑ (en) Richard D. Egleton et Thomas P. Davis, « Development of neuropeptide drugs that cross the blood-brain barrier. », dans NeuroRx, The American Society for Experimental NeuroTherapeutics, vol. 2, 2005, p. 44–53 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 5 mai 2010)]  (article de revue).
20. ↑ (en) H. Träuble, « Carriers and specificity in membranes. 3. Carrier-facilitated transport. Kinks as carriers in membranes. », dans Neurosci. Res. Program Bull., vol. 9, 1971, p. 361–372 [lien PMID (page consultée le 5 mai 2010)] 
21. ↑ (en) A. S. Verkman, « More than just water channels: unexpected cellular roles of aquaporins. », dans J. Cell Sci., vol. 118, 2005, p. 3225–3232 [lien PMID (page consultée le 6 mai 2010)]  (article de revue).
22. ↑ (en) E. M. Cornford et S. Hyman, « Blood-brain barrier permeability to small and large molecules. », dans Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 36, 1999, p. 145–163 [lien PMID (page consultée le 7 mai 2010)] 
23. ↑ (en) Dehouck, Marie-Pierre Dehouck, Jean-Charles Fruchart et Romeo Cecchelli, « Upregulation of the low density lipoprotein receptor at the blood-brain barrier: intercommunications between brain capillary endothelial cells and astrocytes. », dans J. Cell Biol., vol. 126, 1994, p. 465–473 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 8 mai 2010)] 
24. ↑ (en) K. R. Duffy, W. M. Pardridge et R. G. Rosenfeld, « Human blood-brain barrier insulin-like growth factor receptor. », dans Metabolism, vol. 37, 1988, p. 136–140 [lien PMID (page consultée le 8 mai 2010)] 
25. ↑ (en) N. Bodor et P. Buchwald, « Recent advances in the brain targeting of neuropharmaceuticals by chemical delivery systems. », dans Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 36, 1999, p. 229–254 [lien PMID (page consultée le 10 mai 2010)]  (article de revue).
26. ↑ (en) Ulrich Bickel, « How to measure drug transport across the blood-brain barrier. », dans NeuroRx, vol. 2, 2005, p. 15–26 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 10 mai 2010)]  (article de revue).
27. ↑ ^{a et b} (en) J. Fenstermacher et L. Wei, « Measuring local cerebral capillary permeability-surface area products by quantitative autoradiography. », dans W. M. Pardridge, Introduction to the Blood-brain Barrier, Cambridge University Press, 1998 (ISBN 0-521-58124-9), p. 122–132 
28. ↑ (en) A. M. Peters, « Fundamentals of tracer kinetics for radiologists. », dans Br. J. Radiol., vol. 71, 1998, p. 1116–1129 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 10 mai 2010)]  (article de revue).
29. ↑ (en) F. Lasbennes et J. Gayet, « Capacity for energy metabolism in microvessels isolated from rat brain. », dans Neurochem. Res., vol. 9, 1984, p. 1–10 [lien PMID (page consultée le 10 mai 2010)] 
30. ↑ (en) M. Gumbleton et K. L. Audus, « Progress and limitations in the use of in vitro cell cultures to serve as a permeability screen for the blood-brain barrier. », dans J. Pharm. Sci., vol. 90, 2001, p. 1681–1698 [lien PMID (page consultée le 10 mai 2010)]  (article de revue).
31. ↑ (en) R. Cecchelli, B. Dehouck, L. Descamps, L. Fenart, V. V. Buée-Scherrer, C Duhem, S. Lundquist, M. Rentfel, G. Torpier et M. P. Dehouck, « In vitro model for evaluating drug transport across the blood-brain barrier. », dans Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 36, 1999, p. 165–178 [lien PMID (page consultée le 10 mai 2010)] 
32. ↑ (en) Scott B. Raymond, Lisa H. Treat, Jonathan D. Dewey, Nathan J. McDannold, Kullervo Hynynen et Brian J. Bacskai, « Ultrasound Enhanced Delivery of Molecular Imaging and Therapeutic Agents in Alzheimer's Disease Mouse Models. », dans PLoS ONE, vol. 3, 2008, p. e2175 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 10 mai 2010)] 
33. ↑ (en) Ikumi Tamai et Akira Tsuji, « Drug delivery through the blood-brain barrier. », dans Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 19, 1996, p. 401–424 [lien DOI (page consultée le 12 mai 2010)]  (article de revue).
34. ↑ ^{a, b et c} (de) Stephanie Nobmann, « Isolierte Gehirn-Kapillaren als in vitro-Modell der Blut-Hirn Schranke », Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg, juin 2001. Consulté le 29 avril 2010
35. ↑ (en) J. B. Van Bree, A. G. De Boer, M. Danhof et D. D. Breimer, « Drug transport across the blood-brain barrier, II. Experimental techniques to study drug transport. », dans Pharma. Weekbl. Sci., vol. 14, 1992, p. 338–348 [lien PMID (page consultée le 12 mai 2010)]  (article de revue)
36. ↑ ^{a et b} (en) E. C. de Lange, M. Danhof, A. G. de Boer et D. D. Breimer, « Methodological considerations of intracerebral microdialysis in pharmacokinetic studies on drug transport across the blood-brain barrier. », dans Brain Res. Brain Res. Rev., vol. 25, 1997, p. 27–49 [lien PMID (page consultée le 14 mai 2010)]  (article de revue).
37. ↑ (en) Daisuke Matsuzawa, « Negative Correlation between Brain Glutathione Level and Negative Symptoms in Schizophrenia: A 3T 1H-MRS Study. », dans PLoS ONE, vol. 3, 2008, p. e1944 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 14 mai 2010)] 
38. ↑ (en) K Albert, H Rembold, G Kruppa, E Bayer, M Bartels et G Schmalzing, « 19F Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of neuroleptics: The first in vivo pharmacokinetics of trifluoperazine in the rat brain and the first in vivo spectrum of fluphenazine in the human brain. », dans Biol. Psychiatry, vol. 30, 1991, p. 656–662 [lien PMID (page consultée le 14 mai 2010)] 
39. ↑ (en) William M. Pardridge, « Blood-brain barrier drug targeting: the future of brain drug development. », dans Mol. Interv., vol. 3, 2003, p. 90–105 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 14 mai 2010)]  (article de revue).
40. ↑ (en) David J. Begley, « Delivery of therapeutic agents to the central nervous system: the problems and the possibilities. », dans Pharmacol. Ther., vol. 104, 2004, p. 29–45 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)]  (article de revue).
41. ↑ Erreur dans la syntaxe du modèle Article(en) William M. Pardridge, « Why is the global CNS pharmaceutical market so under-penetrated? », dans , Drug Discov. Today, vol. 7, 2002, p. 5–7 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
42. ↑ (en) Albertus G. de Boer et Pieter J. Gaillard, « Strategies to improve drug delivery across the blood-brain barrier. », dans Clin. Pharmacokinet., vol. 46, 2007, p. 553–576 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)]  (article de revue).
43. ↑ (en) Albertus G. de Boer et Pieter J. Gaillard, « Drug targeting to the brain. », dans Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., vol. 47, 2007, p. 323–355 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)]  (article de revue).
44. ↑ (en) Brian T. Hawkins et Richard D. Egleton, « Pathophysiology of the blood-brain barrier: animal models and methods. », dans Curr. Top Dev. Biol., Elsevier, vol. 80, 2008, p. 277–309 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)]  (article de revue).
45. ↑ ^{a, b et c} (en) N. Weiss, F. Miller, S. Cazaubon et P. OK Couraud, « The blood-brain barrier in brain homeostasis and neurological diseases. », dans Biochim. Biophys. Acta, 2008, p. epreprint [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)]  (article de revue).
46. ↑ (en) EM Cornford, LD Braun, WH Oldendorf et MA Hill, « Comparison of lipid-mediated blood-brain-barrier penetrability in neonates and adults. », dans Am. J. Physiol., vol. 243, 1982, p. 161C–168C [lien PMID (page consultée le 11 mai 2010)] 
47. ↑ (en) Imdat Elmas, Mutlu Küçük, Rivaze Bulut Kalayci, Aydin Çevik et Mehmet Kay, « Effects of profound hypothermia on the blood-brain barrier permeability in acute and chronically ethanol treated rats. », dans Forensic Science International, vol. 119, 2001, p. 212-216 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
48. ↑ (en) S. C. Phillips et B. G. Cragg, « Weakening of the blood-brain barrier by alcohol-related stresses in the rat. », dans J. Neurol. Sci., vol. 54, 1982, p. 271–27 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
49. ↑ (en) Ashok K Singh, Yin Jiang, Shveta Gupta et Elhabib Benlhabib, « Effects of chronic ethanol drinking on the blood brain barrier and ensuing neuronal toxicity in alcohol-preferring rats subjected to intraperitoneal LPS injection. », dans Alcohol Alcohol, vol. 42, 2007, p. 385–399 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 16 mai 2010)] 
50. ↑ ^{a et b} (en) James Haorah, Bryan Knipe, Santhi Gorantla, Jialin Zheng et Yuri Persidsky, « Alcohol-induced blood-brain barrier dysfunction is mediated via inositol 1,4,5-triphosphate receptor (IP3R)-gated intracellular calcium release. », dans J. Neurochem., vol. 100, 2007, p. 324–336 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
51. ↑ (en) James Haorah, David Heilman, Bryan Knipe, Jesse Chrastil, Jessica Leibhart, Anuja Ghorpade, Donald W. Miller et Yuri Persidsky, « Ethanol-induced activation of myosin light chain kinase leads to dysfunction of tight junctions and blood-brain barrier compromise. Alcoholism. », dans Clinical and Experimental Research, vol. 29, 2005, p. 999–1009 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
52. ↑ (en) J. Haorah, B. Knipe, J. Leibhart, A. Ghorpade et Y. Persidsky, « Alcohol-induced oxidative stress in brain endothelial cells causes blood-brain barrier dysfunction. », dans Journal of Leukocyte Biology, vol. 78, 2005, p. 1223–1232 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 4 juin 2010)] 
53. ↑ (en) Ruth Peters, Ruth Poulter, James Warner, Nigel Beckett, Lisa Burch et Chris Bulpitt, « Smoking, dementia and cognitive decline in the elderly, a systematic review. », dans BMC Geriatr., vol. 8, 2008, p. 36 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 16 mai 2010)]  (article de revue).
54. ↑ ^{a et b} (en) P. R. Lockman, G. McAfee, W. J. Geldenhuys, C. J. Van der Schyf, T. J. Abbruscato et D. D. Allen, « Brain uptake kinetics of nicotine and cotinine after chronic nicotine exposure. », dans J. Pharmacol. Exp. Ther., vol. 314, 2005, p. 636–642 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
55. ↑ (en) Thomas J. Abbruscato, Steve P. Lopez, Karen S. Mark, Brian T. Hawkins et Thomas P. Davis, « Nicotine and cotinine modulate cerebral microvascular permeability and protein expression of ZO-1 through nicotinic acetylcholine receptors expressed on brain endothelial cells. », dans J. Pharm. Sci., vol. 91, 2002, p. 2525–2538 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
56. ↑ (en) Brian T. Hawkins, Thomas J. Abbruscato, Richard D. Egleton, Rachel C. Brown, Jason D. Huber, Christopher R. Campos et Thomas P. Davis, « Nicotine increases in vivo blood-brain barrier permeability and alters cerebral microvascular tight junction protein distribution. », dans Brain Res., vol. 1027, 2004, p. 48–58 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
57. ↑ (en) Yu-Hua Chen, Steven Han-Min Chen, Ambrose Jong, Zhao Yi Zhou, Wei Li, Kazuhiro Suzuki et Sheng-He Huang, « Enhanced Escherichia coli invasion of human brain microvascular endothelial cells is associated with alternations in cytoskeleton induced by nicotine. », dans Cell Microbiol., vol. 4, 2002, p. 503–514 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
58. ↑ (en) P. R. Lockman, C. J. Van der Schyf, T. J. Abbruscato et D. D. Allen, « Chronic nicotine exposure alters blood-brain barrier permeability and diminishes brain uptake of methyllycaconitine. », dans J. Neurochem., vol. 94, 2005, p. 37–44 [lien PMID (page consultée le 16 mai 2010)] 
59. ↑ (en) Michael Kotlyar et Dorothy K. Hatsukami, « Managing nicotine addiction. », dans J. Dent. Educ., vol. 66, 2002, p. 1061–1073 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
60. ↑ (en) Paul R. Pentel, « A nicotine conjugate vaccine reduces nicotine distribution to brain and attenuates its behavioral and cardiovascular effects in rats. », dans Pharmacol. Biochem. Behav., vol. 65, 2000, p. 191–198 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
61. ↑ (en) D. E. Keyler, D. Shoeman, M. G. LeSage, A. D. Calvin et P. R. Pentel, « Maternal vaccination against nicotine reduces nicotine distribution to fetal brain in rats. », dans J. Pharmacol. Exp. Ther., vol. 305, 2003, p. 587–592 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 17 mai 2010)] 
62. ↑ (en) Mark G. LeSage, Daniel E. Keyler, Yoko Hieda, Greg Collins, Danielle Burroughs, Chap Le et Paul R. Pentel, « Effects of a nicotine conjugate vaccine on the acquisition and maintenance of nicotine self-administration in rats. », dans Psychopharmacology, vol. 184, 2006, p. 409–416 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
63. ↑ (en) John A. D'Andrea, C.K. Chou, Sheila A. Johnston et Eleanor R. Adair, « Microwave effects on the nervous system. », dans Bioelectromagnetics, vol. 6, 2003, p. 107–147 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)]  (article de revue).
64. ↑ (en) Tarak H. Patel, Shane Sprague, Qin Lai, David F. Jimenez, Constance M. Barone et Yuchuan Ding, « Blood brain barrier (BBB) dysfunction associated with increased expression of tissue and urokinase plasminogen activators following peripheral thermal injury. », dans Neurosci. Lett., vol. 444, 2008, p. 222–226 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
65. ↑ (en) Ingeburg Ruppe, « Aufbau und Funktion der Blut-Hirn-Schranke. », dans Newsletter, vol. 1, 2003, p. 15–17 [texte intégral (page consultée le 17 mai 2010)] 
66. ↑ (en) B. R. Persson, L. G. Salford, A. Brun, J. L. Eberhardt et L. Malmgren, « Increased permeability of the blood-brain barrier induced by magnetic and electromagnetic fields. », dans Ann. N. Y. Acad. Sci., vol. 649, 1992, p. 356–358 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
67. ↑ (en) Leif G. Salford, Arne E. Brun, Jacob L. Eberhardt, Lars Malmgren et Bertil R. R. Persson, « Nerve cell damage in mammalian brain after exposure to microwaves from GSM mobile phones. », dans Environ. Health Perspect., vol. 111, 2003, p. 881–883 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
68. ↑ (en) Henrietta Nittby, Gustav Grafström‌, Jacob L. Eberhardt, Lars Malmgren, Arne Brun‌, Bertil R. R. Persson et Leif G. Salford, « Radiofrequency and extremely low-frequency electromagnetic field effects on the blood-brain barrier. », dans Electromagn. Biol. Med., vol. 27, 2008, p. 103–126 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)]  (article de revue).
69. ↑ (en) Jacob L. Eberhardt, Bertil R. R. Persson, Arne E. Brun, Leif G. Salford et Lars O. G. Malmgren, « Blood-brain barrier permeability and nerve cell damage in rat brain 14 and 28 days after exposure to microwaves from GSM mobile phones. », dans Electromagn. Biol. Med., vol. 27, 2008, p. 215–229 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
70. ↑ (en) LG Salford, A Brun, K Sturesson, JL Eberhardt et BR Persson, « Permeability of the blood-brain barrier induced by 915 MHz electromagnetic radiation, continuous wave and modulated at 8, 16, 50, and 200 Hz. », dans Microsc. Res. Tech., vol. 27, 1994, p. 535–542 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
71. ↑ (en) Helmut Franke, E.B. Ringelstein et F. Stögbauer, « Electromagnetic fields (GSM 1800) do not alter blood-brain barrier permeability to sucrose in models in vitro with high barrier tightness. », dans Bioelectromagnetics, vol. 26, 2005, p. 529–535 [lien PMID (page consultée le 17 mai 2010)] 
72. ↑ (en) Hanns-Joachim Weinmann, Robert C. Brasch, Wolf-R. Press1 et George E. Wesbey, « Characteristics of Gadolinium-DTPA Complex: A Potential NMR Contrast Agent. », dans Am. J. Roentgenol., vol. 142, 1984, p. 619–624 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 18 mai 2010)] 
73. ↑ (en) Robert C. Brasch1, Hanns-Joachim Weinmann et George E. Wesbey, « Contrast-enhanced NMR imaging: animal studies using gadolinium-DTPA complex. », dans Am. J. Roentgenol., vol. 142, 1984, p. 625–630 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 18 mai 2010)] 
74. ↑ (en) Val M. Runge, John E. Kirsch, John W. Wells, John N. Dunworth et Cecil E. Woolfolk, « Visualization of Blood-Brain Barrier Disruption on MR Images of Cats with Acute Cerebral Infarction: Value of Administering a High Dose of Contrast Material. », dans Am. J. Roentgenol., vol. 162, 1994, p. 431–435 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 18 mai 2010)] 
75. ↑ (en) M. A. Ibrahim, J. F. Emerson et C. W. Cotman, « Magnetic resonance imaging relaxation times and gadolinium-DTPA relaxivity values in human cerebrospinal fluid. », dans Invest. Radiol., vol. 33, 1998, p. 153–162 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)] 
76. ↑ (en) A. V. Alexandrov, L. E. Ehrlich, C. F. Bladin et S. E. Black, « Clinical significance of increased uptake of HMPAO on brain SPECT scans in acute stroke. », dans J. Neuroimaging, vol. 6, 1996, p. 150–155 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)]  (article de revue).
77. ↑ (en) J. C. Masdeu et J. Arbizu, « Brain single photon emission computed tomography: technological aspects and clinical applications. », dans Semin. Neurol., vol. 28, 2008, p. 423–434 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)] 
78. ↑ (de) Marco Essig, « Bildgebende CT-Diagnostik beim Schlaganfall », dans Visions, vol. 12, 2005, p. 15–17 
79. ↑ (en) K. A. Miles, « Perfusion CT for the assessment of tumour vascularity : which protocol ? », dans Br. J. Radiol., vol. 76, 2003, p. 36–42 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 18 mai 2010)] 
80. ↑ (en) David A. C. Leggett, Kenneth A. Miles et Benjamin B. Kelley, « Blood-brain barrier and blood volume imaging of cerebral glioma using functional CT: a pictorial review. », dans Eur. J. Radiol., vol. 30, 1999, p. 185–190 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)]  (article de revue).
81. ↑ (de) Paul Ehrlich, Das Sauerstoff-Bedürfniss des Organismus: Eine Farbenanalytische Studie. (Thèse de doctorat), Berlin, August Hirschwald, 1885 
82. ↑ (de) Paul Ehrlich, Ueber die Beziehungen von chemischer Constitution, Verteilung und Pharmakologischer Wirkung. Gesammelte Arbeiten zur Immunitaetsforschung., Berlin, August Hirschwald, 1904, p. 574 
83. ↑ (de) Edwin E. Goldmann, « Die äußere und innere Sekretion des gesunden und kranken Organismus im Lichte der vitalen Färbung. », dans Beitr. Klin. Chirurg., vol. 64, 1909, p. 192–265 
84. ↑ (de) Edwin E. Goldmann, « Vitalfärbung am Zentralnervensystem. », dans Abh. K. Preuss. Akad. Wiss. Phys. Med., vol. 1, 1913, p. 1–60 
85. ↑ (de) A. Biedl et R. Kraus, « Über eine bisher unbekannte toxische Wirkung der Gallensäuren auf das zentrale Nervensystem. », dans Zentralblatt Innere Medizin, vol. 19, 1898, p. 1185–1200 
86. ↑ (de) Max Lewandowsky, « Zur Lehre von der Cerebrospinal Flüssigkeit. », dans Zentralblatt Klinische Medizin, vol. 40, 1900, p. 480–494 
87. ↑ ^{a et b} (en) B. T. Hawkins et T. P. Davis, « The blood-brain barrier/neurovascular unit in health and disease. », dans Pharmacol. Rev., vol. 57, 2005, p. 173–185 [lien PMID (page consultée le 29 avril 2010)]  (article de revue).
88. ↑ (en) C. S. Roy et C. S. Sherrington, « On the regulation of the blood supply of the brain. », dans J. Physiol., vol. 11, 1890, p. 85–108 [texte intégral (page consultée le 18 mai 2010)] 
89. ↑ (en) Olaf B. Paulson et Eric A. Newman, « Does the release of potassium from astrocyte endfeet regulate cerebral blood flow? », dans Science, American Association for the Advancement of Science (États-Unis), vol. 237, 1987, p. 896–898 [[http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender. fcgi?tool=pubmed&pubmedid=3616619 texte intégral], lien PMID (pages consultées le 2 mai 2010)] 
90. ↑ (en) A. A. Vein, « Lina Stern: Science and fate », dans Annual Meeting of the International Society for the History of the Neurosciences, vol. 11, 2006 [texte intégral (page consultée le 18 mai 2010)] 
91. ↑ (de) Friedrich Karl Walter, « Die allgemeinen Grundlagen des Stoffaustausches zwischen dem Zentralnervensystem und dem übrigen Körper. », dans Arch. Psychiatr. Nervenkr., vol. 101, 1930, p. 195–230 
92. ↑ (de) Hugo Spatz, « Die Bedeutung der vitalen Färbung für die Lehre vom Stoffaustausch zwischen dem Zentralnervensystem und dem übrigen Körper. », dans Arch. Psychiatr. Nervenkr., vol. 101, 1933, p. 267–358 
93. ↑ (en) Ulrich Friedemann, « Blood-brain barrier. », dans Physiol. Rev., vol. 22, 1942, p. 125–145 [résumé (page consultée le 18 mai 2010)] 
94. ↑ (en) R. D. Tschirgi, « Blood-brain barrier : fact or fancy ? », dans Fed. Proc., vol. 21, 1962, p. 665–671 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)] 
95. ↑ (en) G. Miller, « Drug targeting. Breaking down barriers. », dans Science, vol. 297, 2002, p. 1116–1118 [lien PMID (page consultée le 18 mai 2010)] 
96. ↑ (en) William M. Pardridge, « The blood-brain barrier: bottleneck in brain drug development. », dans NeuroRx, vol. 2, 2005, p. 3–14 [texte intégral (page consultée le 5 mai 2010)]  (article de revue).
97. ↑ (en) T. S. Reese et M. J. Karnovsky, « Fine structural localization of a blood-brain barrier to exogenous peroxidase. », dans J. Cell Biol., vol. 34, 1967, p. 207–217 [texte intégral, lien PMID (pages consultées le 18 mai 2010)]